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Thp-1細胞高效率轉染試劑
更新時(shí)間:2024-06-26
訪(fǎng)問(wèn)量:1178
廠(chǎng)商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:美國
Thp-1細胞高效率轉染試劑高效率轉染條件分享
一、轉染材料準備
1. 轉染試劑用量:10ul
2. siRNA濃度:20um/L
3. 細胞密度:1*106-1*105
4. 轉染用培養板:6孔板
5. 轉染試劑:Advanced DNA RNA轉染試劑;
貨號:AD600025
6. 轉染時(shí)間:48小時(shí)
7. 細胞培養胎牛血清:Z7180FBS-500超低內毒素胎牛血清
8. 細胞凍存液:L0100無(wú)血清細胞凍存液.
注意:本細胞轉染用量條件不適合lipo使用。
二、操作過(guò)程:
1.提前1天接種細胞:細胞匯合度在60-80%左右,再進(jìn)行轉染。
2. 核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照比例關(guān)系直接混合,用移液器吹打、混勻,室溫靜止15分鐘。
3.在細胞培養基中加入核酸復合物:根據參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養基里面可以含有血清。
4.細胞換液:轉染24小時(shí)后對細胞進(jìn)行正常換液,懸浮細胞轉染過(guò)程中不用換液。
5.分析結果:質(zhì)粒DNA轉染48-72小時(shí)后熒光檢測轉染效率,48-96小時(shí)檢測mRNA或蛋白表達。若進(jìn)行穩定表達細胞株的篩選,則在轉染后24-48小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA轉染后9小時(shí)熒光檢測轉染效率,48-72小時(shí)檢測mRNA或蛋白表達。
三、產(chǎn)品說(shuō)明:
1、產(chǎn)品名稱(chēng)
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、Thp-1細胞高效率轉染試劑貨號規格
貨號:AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD601000
規格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml、5ml、10ml
3、儲存條件
常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復凍融。