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    無(wú)血清培養基的主要添加成分說(shuō)明

    發(fā)布時(shí)間: 2022-02-11  點(diǎn)擊次數: 938次
       無(wú)血清培養基是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長(cháng)時(shí)間生長(cháng)繁殖的合成培養基。該培養基的基本配方為基礎培養基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細胞在體外培養時(shí),多數呈貼壁生長(cháng)或兼性貼壁生長(cháng);而當其在無(wú)血清、無(wú)蛋白培養基中生長(cháng)時(shí),由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長(cháng)。
      無(wú)血清培養基的主要添加成分如下:
      1.促貼壁物質(zhì)
      許多細胞必須貼壁才能生長(cháng),這種情況下無(wú)血清培養基中一定要添加促貼壁和擴展因子,一般為細胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著(zhù)重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來(lái)自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質(zhì)細胞、CHO細胞、成肌細胞等。
      2.促生長(cháng)因子及激素
      針對不同細胞添加不同的生長(cháng)因子。激素也是刺激細胞生長(cháng)、維持細胞功能的重要物質(zhì),有些激素是許多細胞必需的,如胰島素。
      3.酶抑制劑
      培養貼壁生長(cháng)的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無(wú)血清培養基中要須含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶;抑制劑。
      4.結合蛋白和轉運蛋白
      常見(jiàn)如鐵轉蛋白和牛血清蛋白。牛血清蛋白的添加比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無(wú)血清培養基都含有牛血清白蛋白。
      5.微量元素:硒是常見(jiàn)的微量元素。
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